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淡水珍珠蚌三角帆蚌(Hyriopsis Cumingii)病害及防治技术研究进展

淡水珍珠蚌三角帆蚌(hyriopsis cumingii)病害及防治技术研究进展

 

张根芳1   吴信忠2   方爱萍3

(1.金华职业技术学院 金华 321000,2.浙江大学动物科学学院 杭州 310029,

3.金华市威旺养殖新技术有限公司 金华 321017)

 

摘要  作者结合近10年蚌病研究和防治的工作,回顾过去20年来蚌病研究的进展,对三角帆蚌的主要疾病、流行病学、防治药物及其毒理学和防治对策与方法等方面进行了综述,并就蚌病研究存在的问题、热点及前景进行了阐述和讨论。

关键词   三角帆蚌,病害,防治技术,研究进展

中图分类号: s968.3          文献标志码:a        

advances in the studies on freshwater mussel hyriopsis cumingii diseases and its control

zhang gen-fang1  wu xinzhong2   fang ai-ping3

(1.jinhua college of profession and technology,jinhua 321007;

2. college of animal sciences, zhejiang university, hangzhou 310029; 3. jinhua wellwant aquaculture tech. co.,ltd.,jinhua 321017)

abstract: advances in the studies on the pathogen, epizootiology, pathology, toxicology of medicines, prevent ion and control, and so on of freshwater mussel(hyriopsis cumingii )diseases, during twenty years have been reviewed combined with our experience for prevention and cure of diseases in freshwater mussel(hyriopsis cumingii)about more than ten years. and finally current problems, focus and future prospects on freshwater mussel diseases research were put out.

key words: hyriopsis cumingii;diseases;control;advances

 

通[1]过20年来的发展,淡水珍珠养殖业后来居上,迅速超过了海水珍珠的产量,并充分依托其水体环境的可控性特点,逐步形成了规模化和产业化生产,使得我国目前珍珠产量达到1200吨左右,稳居世界首位,成为少数几种能够在国际市场占有一席之地的产品之一[1]。淡水珍珠养殖生产在短时期超常规迅猛发展,相反,淡水珍珠蚌的生物学基础研究以及育珠、良种选育、苗种规范化生产、养殖生产管理和蚌病防治等工作远远跟不上生产发展的需要[2]。致使近10年来蚌病在大范围内此起彼落频繁发生,成为制约淡水珍珠生产的瓶颈。

1982年国内对淡水珍珠育珠蚌的发病进行了初步的研究报道 [3,5],至今已有20余年的历史,淡水养殖贝类病害的研究虽然比海水贝类早,但却远较后者滞后,有关蚌病的研究还相当粗浅,有的甚至是空白。这与强劲发展的淡水珍珠业,以及由此形成的珍珠生产大国是极不相称的。目前,国内主要采用三角帆蚌(hyriopsis cumingii lea)作为优质育珠蚌,所以现有蚌病的研究即以三角帆蚌为对象。为此,作者结合近10年来在蚌病防治方面所做的研究工作,试图通过回顾过去20年来的三角帆蚌疾病研究走过的历程,以此来呼吁重视三角帆蚌疾病的研究工作。

1  三角帆蚌疾病流行情况

1975年在江苏省无锡首次发生育珠蚌发病,到70年代末至80年代初,蚌病已在江浙普遍流行。1986年开始,由江浙波及到安徽、江西、湖北、湖南等省的多数育珠生产区[4]。1993年殷战等[4]研究初步认为影响蚌病发生的主要内因有:病原首先感染体质差的育珠蚌并大量增殖,不同情况下育珠蚌易感性有差异;蚌病发生的主要外因有:养殖水体有机污染导致的富营养化,手术操作消毒不严格,日常管理操作不科学,病死蚌腐烂导致病原体大量滋生扩散。

张根芳等 [2]通过对1万余个蚌病病例(解剖、镜检病蚌样品4万3千多只面积达57.73万亩,治疗珠蚌数量6.81亿多只,治愈率达到78.9%)的诊治研究发现,蚌病发生与育珠手术消毒不严,蚌苗种质退化、抗病力下降,禽类粪肥使用方法不当等有明显相关性;蚌病一般表现为“亚急性”或“慢性型”,蚌病全年都可发生,特别是集中在3-9月;育珠手术后1-2个月、14-15个月、20-23个月有3个明显的疾病高发阶段,同时蚌病发生与水体环境关系密切。

2  三角帆蚌的主要疾病

2. 1  病毒性疾病

1982年王迎喜等[5]根据病毒感染的流行病学原理对江苏省无锡疫区三角帆蚌病毒病原进行研究,结果没有发现病毒粒子的存在。1986年沈志荣[6]、张治国[7]分别分离,认为“蚌瘟”为病毒性传染病,1987年张治国[8]对此病毒性病原进行初步鉴定,认为可能是嵌砂样病毒(arenavirus),并命名为三角帆蚌瘟病病毒(hyriopsis cumingii plague virus, hcpv)。1992年孟枋等[9]对蚌瘟病毒进行了分离和保存实验,在0-4℃保存6个月,-20℃保存一年,其毒力不减;1992年邵健忠等[10]对三角帆蚌瘟病病毒(hcpv)的粗细结构与基因组及多肽进行研究,病毒粒子被囊膜,有棒状突起,少数病毒有数目不定的致密“砂粒”,为嵌砂样病毒。张元培[11]对“蚌瘟”病原媒介藻进行筛选,认为蓝藻门的铜锈微囊藻等九种藻类为病毒媒介藻,以硅藻门为主的共23种藻类为病毒的非媒介藻。邵健忠等[12]对三角帆蚌11种组织中16种同工酶系统酶谱表型、组织分布、活性含量和迁移特征进行分析,证实酯酶和x-磷酸甘油脱氢酶的表型和活性含量在瘟病病蚌体内有明显的紊乱现象,表明三角帆蚌瘟病理机制与消化系统脂类代谢异常有密切关系。邵健忠等[13]研究还发现三角帆蚌瘟病组织病理变化主要集中在病蚌的肝脏、胃和直肠等组织,导致细胞内消化作用受阻,消化功能丧失而死亡。而1993年刘尧服等[14]对江西省疫区三角帆蚌病毒病原进行研究,发现病毒粒子圆形或椭圆形,有囊膜,二十面体对称,大小在80-120nm,主要集中在细胞核,因此定为蚌的类疱疹病毒(freshwater mussel herpesviroid virus)。

至今为止,导致珠蚌瘟病的病毒性病原是否是“类疱疹病毒”还是“嵌砂样病毒”或者 仅仅是“类疱疹病毒”和“嵌砂样病毒”还不清楚,而其产生的相应病理变化和临床症状是否有共性?也未有更深入的研究。

2. 2  细菌性疾病

倪达书等[3]对江苏无锡养蚌区的流行病进行了研究,分离到“帆蚌点状产气单胞菌”(aeromonas punctata hyriopsae sub sp. nov );而后,钱旭初等(1984)[15]、陈锦富等(1988)[16]分离得到嗜水气单胞菌(ameromonas hrdr-ophila);1993年徐伯亥等[17]分离到对鱼类无毒力,却能致蚌死亡的河弧菌生物变种iv(virus fluvialis iv)以及耐盐产气单胞菌(aeromonas stenohalis xu & yin sp.nov );1999年黄向荣等[18]研究了不同来源嗜水气单胞菌对三角帆蚌的致病性,发现甲鱼嗜水气单胞菌对三角帆蚌的毒力最大,而乌鳢及鲢鱼嗜水气单胞菌毒力次之,牛蛙嗜水气单胞菌毒力最弱。

1999年,张根芳等[19]报道了多种细菌性病原引起的蚌病的病症以及和复杂多样的病理变化之间的关系,特别是黏液、消化腺、鳃、斧足和外套膜等的肉眼症状,以及病原体的显微镜检技术,为蚌病临床诊断技术提供了重要方法。2001年文祝友等[20]研究了嗜水气单胞菌病的组织病理变化,认为嗜水气单胞菌对肝脏危害最为严重,引起肝小管肿大破裂,管腔变小甚至完全堵塞,肝细胞肿大变性直至坏死,间质中大量的嗜酸性细胞浸润;其次是鳃,鳃丝细胞排列松散,纤毛受到不同程度的破坏,甚至脱落,隐窝深处细胞坏死、水肿,细胞内及细胞间出现空泡,粗面内质网扩张,嗜酸性细胞局部聚集,分泌细胞钙化等病理变化。

值得指出得是,细菌、病毒侵袭蚌体后,肝脏都有严重的病变,这对在临床上区别这两类疾病带来很大困难,唯一能够鉴别的线索是鳃组织变化。

三角帆蚌细菌性疾病是种类最多、流行时间最长、危害最大的疾病,并且往往具有继发性,但是目前仍然没有对细菌性疾病进行统一分类与命名。因此张根芳等[19]建议从临床诊断的实际应用出发,主要细菌性蚌病按病症先进一步规范现有病名,如:烂鳃病、红腐足、烂斧足、边缘膜溃疡、外套膜溃疡、胃肠炎、闭壳肌炎与侧齿炎等。这些蚌病分类特征在蚌病防治实践中为蚌病临床诊断提供了容易鉴别的依据,取得了初步成效。

2. 3  寄生性疾病

有关育珠三角帆蚌寄生性疾病的文献报道很少,笔者研究[19]发现三角帆蚌被寄生性病原侵袭的现象十分普遍,而且并发症较多,特别是线虫和轮虫的寄生比其他水产经济动物常见得多。主要寄生虫有:车轮虫、肾形虫、线虫和轮虫。

2. 4  非生物病原引起的疾病

三角帆蚌非生物病原引起的疾病主要有触手溃疡、水肿与藻毒素中毒等几种,这些疾病往往与水质环境有密切关系[21]。

2. 5  附着生物和敌害生物的影响

杨明旭等[22]研究过摇蚊幼虫对育珠蚌的危害。笔者发现摇蚊幼虫最易在稚蚌培育池泛滥,争夺稚蚌生存营养与空间,但是一般不会直接导致蚌壳穿孔。在珠蚌养殖网袋,稚蚌培育网箱内特别容易滋生附着生物。最终在蚌壳上、网袋上形成蜂窝状结构,对幼蚌、育珠蚌的生长和健康带来很大影响。在养蚌育珠水体发现的附着生物种类主要有:腔肠动物、多孔动物、水栖寡毛类、苔藓动物。近几年附着生物的危害日趋严重,它们吸收水体养分,附着在网笼和蚌壳上,并迅速蔓延将其封闭,阻碍珠蚌的呼吸和滤食。主要敌害生物有水蛭、鳑鮍鱼卵以及微囊藻水华等。

3  三角帆蚌疾病防治药物及其毒理学

陈锦富等[23]对三角帆蚌病原嗜水气单胞菌进行的药物敏感性实验,认为链霉素有一定的敏感性。李爱华等[24]对河弧菌生物变种ⅳ和耐盐产气单胞菌进行药物敏感性实验,发现这些菌对主要抗革兰氏阳性菌的窄谱抗菌药有较大的耐药性,而对广谱抗菌药比较敏感。

硫酸铜常用于淡水珍珠养殖中的蚌病防治,但实验发现:经铜溶液处理后,在蚌的肝脏、鳃和外套膜中都有累积,引起机体组织的形态、生理、生化、免疫等方面的一系病变,甚至导致死亡[25]。烟酰苯胺具有杀螺力强、对鱼毒性低的特点,普遍用于灭螺,但试验发现对育珠蚌有很强毒性。在常用灭螺浓度0.5mgl-1条件下,在夏季对育珠蚌的致死作用可长达4周[26]。漂白粉是淡水养殖中经常使用的水体消毒剂,具有成本低廉,效果良好的特点,一般在允许使用剂量下,认为是十分安全的消毒手段。但在1.5mgl-1浓度下,漂白粉可引起育珠蚌外套膜表皮细胞结构和粘液组成改变,在一定程度上抑制贝壳珍珠层的形成,同时影响外套膜钙代谢,影响珍珠的产量和质量 [27]。文春根等[28]研究了6种常用药物对淡水蚌的急性毒性实验,认为高锰酸钾在0-32mgl-1浓度范围内浸浴96小时无中毒反应,鱼虫灵安全浓度为0.13mgl-1,晶体敌百虫为1.30mgl-1,硫酸铜、亚铁合剂为2.93mgl-1,甲醛为15.0mgl-1,冰乙酸为30mgl-1。

4  三角帆蚌疾病防治技术的应用研究

自从上世纪70年代末发生蚌病以后,在研究蚌病病原生物学及其病理学的同时,更多是从生产应用要求出发,积极寻找蚌病防治的措施和方法。有关育珠蚌疾病防治的应用性研究报道较多。但一般是在没有确定病原病症的情况下,普遍采取泼洒生石灰、漂白粉、硫酸铜和各种抗生素的简单做法。

4.1  蚌病的治疗

吴仕根等[29] 认为,在实验室用庆大霉素进行注射法、浸泡法治疗由产气单胞菌引起的蚌病,能取得较好效果。刘介勋[30]则认为采用抗生素注射、浸泡,加之外用消毒剂等,以“治水治蚌治病的综合防治”方法,效果为好。陈锦富等[23]对三角帆蚌嗜水气单胞菌采用注射与浸泡法治疗比较,认为以注射法的效果较为理想。

但是在规模化育珠生产中,注射法和浸泡法都不具可操作性,反而增加人为的对养殖的珍珠蚌的外界应激干扰,往往会使死亡率升高。外用消毒剂倒是最常用的一种方法。上世纪90年代我们在临床诊断基础上,采用“水体杀虫、消毒和豆浆药饵法”的综合蚌病治疗方法,收到了很好效果[31]。

4. 2  蚌病的预防

由于育珠蚌的集约化高密度被动吊养,改变了其生态习性,所以往往更容易受到环境各种胁迫因子的影响。在过去相当一段时间里,由于蚌病治疗无从下手,人们只能预防蚌病,因此这方面报道较多,例如对池塘进行彻底消毒[32],建立水质监控指标[33] ,有效控制水体“水华”[34]等措施的采取可以有效预防疾病的发生。在实际生产中我们认为选择适宜的养殖水体、良好的手术作业、合理的吊养方式与密度和合理的鱼类放养与使用肥料以及定期对水体杀虫、灭菌和泼洒豆浆药饵等也是重要的预防措施[31] 。

育珠手术操作是健康养蚌的关键环节。从控制育珠植片数 [35],手术蚌药物清洗及浸泡[32],制定严格的操作规程[36],注意消毒防止病菌感染[37,38]等方法入手,我们试行全面的手术作业系统化消毒技术后,已经能够有效控制手术后的一般感染、减少次品率、提高珍珠质量,同时能降低手术后1-3个月疾病的发生率[39]。

消灭传染源、自繁蚌苗、控制水源[38,40],在传染病流行季节进行药物预防、定期入池检查,及时发现疾病[31]等具体做法,也可以在一定程度上起到防病作用。

另外,采用支持疗法,使蚌体机能保持稳态、提高育珠蚌免疫力,能有效预防育珠蚌疾病的发生,促进珍珠生长、增加珍珠光泽,如定期不定期的口服豆浆药饵,定期补充矿物盐和微量元素,可以维持育珠蚌正常的矿物质代谢,进而维持育珠蚌旺盛的生命力和高效的珍珠质分泌功能[41]。

4. 3 蚌病的群体控制技术

根据长期以来蚌病防治难的普遍认识,张根芳等[19]开始注意到发病个体和群体的关系,试图从生态学角度,采用群体控制的方法来研究和解决蚌病问题。通过十年的探索,采用物理、化学、生物方法相结合的水体环境改良手段,外用、内服相结合的综合措施,使蚌病控制取得了较为理想的效果——在规模化育珠生产实际应用中蚌病的有效控制率已达到了78.9%左右,并提出了一套蚌病群体控制的技术理论与操作规程[41]。

5  三角帆蚌疾病研究存在的问题、热点及前景

5. 1  主要存在问题

关于三角帆蚌的病原病因及病原生物学研究还存在许多“盲区”,生产中每当养殖育珠蚌发生严重死亡时,往往是无从考究其死亡原因,较多情况下无法弄清其疾病流行的来龙去脉,原因在于基础研究成果积累太少,如“蚌瘟”一般指三角帆蚌病毒性疾病,但生产上往往把没能治愈的暴发性蚌病统称为“蚌瘟”,有些文献、甚至专著也经常不加区分细菌性、病毒性疾病而统称“蚌瘟”,使得谈“蚌瘟”而色变。一直以来主要研究都集中在细菌、病毒方面,很少涉及到寄生虫、敌害生物和非生物病原引起的非传染性疾病方面的研究报道,而作者研究发现,69%的蚌病与寄生虫病相关,而且敌害生物及非生物病原引起的非传染性疾病有逐年增多的趋势。

其次,在蚌病研究领域,除了“蚌瘟”这一不科学的称法外,尚缺少其它疾病的正式命名,缺少蚌病科学的分类体系。这有碍蚌病科学研究的继续深入和学术交流。

还有,长期以来由于“蚌瘟”的误导,使生产者和研究者都对蚌病防治产生了两种极端的认识。其一是认为“蚌病”无药可治。原因是对蚌病科学防治方法的特殊性认识不足,沿用传统的鱼病治疗方法,甚至照搬畜禽疾病治疗方法等而采用注射法、浸泡法、抗生素泼洒法等不适用于蚌病防治的措施,使实际疗效很不理想,所以产生了蚌病都是不治之症的看法。其二是乱治蚌病。这主要表现在生产上,不管是什么蚌病或者什么病原或病因,无论从药物种类、使用方法和剂量等均有极大的随意性。或把带“蚌”字的渔药用下去就了事。

5. 2  研究热点和前景

贝类自身有一套比较有效的防御系统,它们通过血细胞及其细胞因子以及溶酶体、凝集素、外源凝集素和溶血素等多种体液免疫因子的共同作用,可使机体免受外来病原生物的入侵或感染。免疫生物学在国内外海洋贝类病害学领域已经开展[42,43],而淡水贝类免疫学方面的研究尚未起步。

蚌的寄生性病原研究几乎是空白领域,而寄生虫往往是导致细菌感染的重要诱因(近70%的蚌病与寄生虫有关)[2],因此寄生虫在蚌病研究中占有重要地位。蚌病特有的寄生虫种类鉴定、侵染途径和生活史研究应受到重视。

细菌性疾病是珠蚌的主要危害,有关细菌病原的种类、病理等方面的研究也应进一步加强。蚌病研究方法主要是借用鱼类病害研究的传统方法,这些技术和方法的使用为蚌病研究的起步与发展作出了巨大贡献,并且也是当前和今后蚌病研究最常用的方法。但是由于贝类的组织结构及其对疾病的防御系统与鱼类存在较大的差别,因此这些常用方法难以解决蚌病研究中碰到的某些特殊问题。近年来,细胞分离的离心冲淘法、流动血细胞记数法、检测吞噬作用的化学发光法、分子及免疫学检测技术及宿主免疫生物学研究等新方法、新技术和新理论在海洋贝类病害研究中已经得到较快的研究和应用[44,45],在淡水珍珠蚌的病害研究中也借鉴和应用这些技术和方法。使蚌病研究取得更大进展。

 

参 考 文 献

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